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Tris緩沖液的作用及制備方法

 
 
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更新 2021-07-08 11:49
 

武漢德晟生化科技有限公司

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緩沖溶液是包含弱酸及其共軛堿的水基溶液,由于緩沖液的化學(xué)性質(zhì),即使物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化,緩沖液也可以將它的PH值(酸度)保持在幾乎恒定的水平。緩沖液自然存在于血漿中,它保持血液PH值處于7.35-7.45之間。在有機系統(tǒng)中,天然緩沖液將PH值保持在一致的水平。但是在生物研究的過程中,必須通過緩沖液來保持PH值的不變。緩沖液種類繁多,Tris緩沖液是常用的生物緩沖液之一。

什么是 Tris 緩沖液?

Tris 三(羥甲基)氨基甲烷的縮寫,這是一種常用于鹽水中的化合物,因為它是等滲且無毒的, pKa 8.1pH 值介于 7 9 之間,因此 Tris 緩沖溶液也常用于一系列化學(xué)分析和生物研究中,包括 DNA 提取。重要的是要知道 tris 緩沖溶液中的 pH 值會隨溶液溫度而變化。

如何制備 Tris 緩沖液

制備Tris緩沖液非常簡單,只準備以下材料

三(羥甲基)氨基甲烷(TRIS 

蒸餾去離子水

***

步驟

1、首先確定您想要制作的 Tris 緩沖液的濃度(摩爾濃度)和體積。例如,用于生理鹽水的 Tris 緩沖溶液從 10 100 mM 不等。根據(jù)實驗需求,通過將緩沖液的摩爾濃度乘以正在制作的緩沖液的體積來計算所需的 Tris 的摩爾數(shù)。(Tris 的摩爾數(shù) = mol/L x L

2、接下來,通過將摩爾數(shù)乘以 Tris 的分子量 (121.14 g/mol) 來確定這是多少克  Tris 的克數(shù) = (摩爾) x (121.14 g/mol)

3、將 Tris 溶解到蒸餾去離子水中,達到所需最終體積的 1/3 1/2

4、混入 HCl(例如 1M HCl),直到pH 計為您的 Tris 緩沖溶液提供所需的 pH

5、用水稀釋緩沖液以達到所需的最終溶液量。

 

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