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吖啶酯(NSP-SA-NHS)蛋白標記的發(fā)光染料配置說明

 
 
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更新 2021-06-28 13:37
 

武漢德晟生化科技有限公司

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吖啶酯(NSP-SA-NHS)Cas199293-83-9及其相關化合物已被證明是非常有優(yōu)勢的化學發(fā)光標記物,其穩(wěn)定性、活性和敏感性超過了某些放射性同位素。吖啶酯能與含有一級氨基的蛋白發(fā)生反應。在堿性條件下,NHS作為離去基團被取代,蛋白質與吖啶酯形成穩(wěn)定的酰胺鍵。反應完成后,多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。

在存在堿性過氧化氫時,吖啶標記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。具體發(fā)光原理是在堿性過氧化氫溶液中,吖啶酯受到過氧化氫離子的進攻,生成一個有張力的不穩(wěn)定的二氧乙烷,進一步分解成CO2和電子激發(fā)態(tài)的吖啶酮,當吖啶酮回到基態(tài)時發(fā)出最大吸收波長430nm的光子。

這個發(fā)光過程是十分短暫(整個過程的發(fā)生小于2秒),觸發(fā)方案必須增加內部光度計和光子探測器;另外,也可以使用配備自動進樣器的多功能酶標儀進行發(fā)光數(shù)據(jù)采集。蛋白質,多肽,抗體,核酸都可以用本產品進行標記。吖啶酯在堿性過氧化氫的激發(fā)下快速發(fā)光,因此通過收集光子可以檢測到標記化合物。

主要用于:化學發(fā)光及免疫分析、受體分析、核酸及多肽檢測等研究。

儲存條件: 20℃,避光

運輸條件:  2-8℃,避光

1.配制說明

標記緩沖液:0.2M NaHCO3  (pH=9.0)

標記終止緩沖液: 10% 賴氨酸  0.2M NaHCO3  (pH=9.0)溶液;

脫鹽純化緩沖液:0.1M Na2HPO4-NaH2PO4  (pH=6.5);

吖啶酯發(fā)光液:(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2 。

2. 計算標記所用抗體(蛋白質)和吖啶酯的量:

通常設定摩爾比n(抗體): n(吖啶酯)=1:10~1:50,具體需根據(jù)氨基酸組分進行摸索調整;

配制2.5mg/ml 吖啶酯-DMSO母液,注意玻璃器皿盛放并避光;

使用0.2M NaHCO3pH=9.0) 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗體反應液 。

需要注意的是,吖啶酯標記的蛋白可以在酸性緩沖液中4℃避光存儲(注意補加疊氮鈉等防腐劑),如果儲存效果不佳,則請避光保存于-20℃或者-80℃。德晟專業(yè)生產化學發(fā)光試劑、化學發(fā)光底物和酶的顯色底物以及體外診斷試劑。我們還可以接受定制合成服務,歡迎前來咨詢訂購!

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