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大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫反應(yīng)測(cè)試盒

 
 
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更新 2013-01-18 14:59
 

博奧通科科技(北京)有限公司

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  • 北京
  • 上次登錄 2013-01-15
  • 韋澤 (先生)  
詳細(xì)說(shuō)明

REAGEN大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫反應(yīng)測(cè)試盒
RNB93002
 
1.概述
REAGEN大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒是用來(lái)檢測(cè)食品和飼料中大腸桿菌O157:H7的含量。大腸桿菌O157:H7是腸桿菌家族的一種革蘭氏陰性菌,“O”指的是菌體抗原,“H”指的是鞭毛抗原,這是大腸桿菌數(shù)以百計(jì)血清型中的一種。大多數(shù)片段是無(wú)害的,通常存在在哺乳動(dòng)物的腸中。這個(gè)O157:H7片段能產(chǎn)生志賀祥毒素,是腸出血性大腸桿菌(EHEC)級(jí)的一個(gè)成員,會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的疾病,感染上腸出血性大腸桿菌的人會(huì)出現(xiàn)腸出血癥和溶血性尿毒綜合癥。污染致病原主要存在于:生的細(xì)紋牛肉、未經(jīng)巴氏消毒的牛奶、未經(jīng)處理的水、果汁、嫩芽、生菜和臘腸中。
檢測(cè)食品中大腸桿菌O157:H7既費(fèi)力又費(fèi)時(shí)。REAGEN大腸桿菌O157:H7酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒為國(guó)家管理部門(mén)、食品生產(chǎn)商、質(zhì)檢部門(mén)提供了方便有效的方法,檢測(cè)水平為105細(xì)胞/ml。
2.試劑盒原理
該試劑盒基于酶聯(lián)免疫檢測(cè)原理,大腸桿菌O157:H7的單克隆抗體包被在微孔內(nèi)。分析過(guò)程中,如果樣品中有大腸桿菌存在,當(dāng)加入樣品時(shí),即可與單抗結(jié)合,在孔中加入適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液可以快速增菌。酶標(biāo)記的二抗與板孔中包被的一抗結(jié)合,加入底物后顏色的深淺與樣品中大腸桿菌O157:H7的含量相關(guān)。
3. 試劑盒組成
試劑盒組成
規(guī)格
保存
抗體包被的酶標(biāo)板
12×8 孔
2-8°C
1×陰性對(duì)照
1×1ml
-20°C
1×陽(yáng)性對(duì)照
1×1ml
-20°C
50×HRP- 二抗
3×50ml
-20°C
二抗稀釋液(
1×20ml
2-8°C
20×濃縮洗液
1×30mL
2-8°C
終止液
1×20mL
2-8°C
TMB底物
1×10mL
2-8°C
 
4. 檢測(cè)限105細(xì)胞/ml
5. 交叉反應(yīng):
本試劑盒可檢測(cè)大腸桿菌O157:H7抗原
6.其他需要而本試劑盒未提的設(shè)備或材料
ü          酶標(biāo)儀(450nm)
ü          恒溫培養(yǎng)箱
ü          漩渦振蕩器
ü          移液器(10、20和100mL,1mL各一支)
ü          多道移液槍:50-300ml(可選擇)
ü          mTSB培養(yǎng)基:含有10g/L酪蛋白氨基酸和1.5g/L磷酸氫二鉀的胰化酪蛋白大豆培養(yǎng)基
7.注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)閱讀以下文字,以保證獲得最佳實(shí)驗(yàn)效果。
ü          樣品中含有大腸桿菌,請(qǐng)小心使用。
ü          進(jìn)行樣品準(zhǔn)備過(guò)程中,操作人員必須有好的微生物操作技能。
ü          不要使用過(guò)期的試劑盒。
ü          不同批次的試劑盒不要混用,確保二抗正確稀釋。
ü          盡量保持室溫20-25℃,避免在通風(fēng)口操作防止溫度過(guò)低,過(guò)熱和/或者蒸發(fā)。不要在陽(yáng)光直射下實(shí)驗(yàn),防止過(guò)熱及蒸發(fā)。在孵育期間,如果工作臺(tái)溫度過(guò)低,應(yīng)該鋪墊紙巾或其他物料。
ü          水質(zhì)量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水。
ü          加入樣品或者試劑到空的微孔板時(shí),吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。
ü          孵育時(shí)間的計(jì)算越規(guī)范越好,保持添加標(biāo)準(zhǔn)品的一致性,先添加標(biāo)準(zhǔn)品后添加樣品。
ü          從低濃度到高濃度地添加標(biāo)準(zhǔn)品,降低影響標(biāo)準(zhǔn)品曲線質(zhì)量的風(fēng)險(xiǎn)。
ü          將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,冷藏保存。
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