吖啶酯（NSP-SA-NHS）CAS：199293-83-9和相關化合物已被證明是非常有優勢的化學發光標記物，穩定性，活性和敏感性超過了那些放射性同位素。在堿性條件下，NHS將會離去，吖啶酯將會以一個穩定的酰胺鍵與蛋白質結合形成吖啶化合物。反應完成后，多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。在存在堿性過氧化氫，吖啶標記的蛋白不需要酶催化可自行發光。加入激發試劑后，體系立即釋放光子，可以用430nm標準光度計檢測。這個發光過程是十分短暫（整個過程的發生小于2秒），觸發方案必須增加內部光度計和光子探測器。蛋白質，多肽，抗體，核酸都可以用吖啶標記。標記化合物在堿性過氧化氫的激發下快速發光，通過收集光子可以檢測到標記化合物。

產品穩定性：

1. 在酸性溶液中(pH<4.8)都很穩定，與蛋白質偶聯物在室溫下保存4周，其光量子產率不降低，凍干品在-20℃下，可以保存一年以上。

2. 當pH>4.8，尤其在堿性溶液中，吖啶化合物由于部分發生水解降低了其穩定性，水解過程為不發光的暗反應過程；水解程度隨pH增大而增大，隨溫度的升高而增大。

3. 吖啶酰胺穩定性較高于吖啶酯結構，抗水解能力較強。

4. 吖啶環或酚環或苯磺酰環上連有甲基等給電基團，由于空間位阻大，熱穩定性增加；連有吸電子基團，有利于親核取代反應而使其穩定性下降。

5. 建議：偶聯后保存用的緩沖液盡量用弱酸性的緩沖液，鼓氮氣除去其中的氧氣。密封避光低溫保存。有條件的可以制成凍干樣再保存。

注意事項：

1. 吖啶酯除了DMF，也可以用無水DMSO等非質子性溶劑來溶解。通常吖啶酯用DMF較高溶解的濃度為4mM (約2.7mg/ml)，我司生產的吖啶酯中DMSO中溶解度可達10mg/ml。

2. 標記前，由于吖啶酯末端羧基經NHS活化，較為活潑，請用非質子性的干燥無水溶劑來溶解；標記后，標記后吖啶酯與被標記物之間以酰胺鍵或者酯鍵等形式存在，酸性溶劑基本沒有影響；吖啶酯本身活性位點在堿性和氧化環境下不穩定，因此應根據被標記物的穩定性配制相應的非強堿性非氧化的體系中處理和保存。

3. 發光標記物在光照條件下有可能部分分解，以致影響發光效果。吖啶酯的實驗操作和儲存建議避光條件下處理，目前暫時沒有具體的研究數據。

4. 吖啶酯標記蛋白等大分子化合物建議用G25脫鹽柱分離；吖啶酯標記小分子化合物建議用柱層析分離；

5. 吖啶酯發光過程是十分短暫（整個過程的發生小于2秒），觸發方案必須增加內部光度計和光子探測器；另外，本產品也可以使用配備自動進樣器的多功能酶標儀進行發光數據采集，較大限度降低加樣時間對采集信號的影響。